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Annexin V-PE/ 7-AAD熒光雙染細胞凋亡檢測試劑盒

貨號:P-CA-206

價格:¥950¥1480¥2280¥3380

規格:
20T
  • 20T
  • 50T
  • 100T
  • 200T
數量: - +
  • Annexin V-PE/ 7-AAD熒光雙染細胞凋亡檢測試劑盒
產品概述

      Annexin V-PE/7-AAD熒光雙染細胞凋亡檢測試劑盒用于鑒定凋亡和壞死細胞。
      Annexin V是一種鈣離子依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸PS有高度親和力,可通過細胞外側暴露的PS與凋亡早期細胞胞膜結合,將Annexin V標記熒光染料PE利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡。
      7-AAD可與雙鏈DNA特異性結合,并產生強烈的熒光,正常情況下無法透過細胞膜。由于凋亡晚期或壞死細胞膜喪失完整性,7-AAD可進入細胞內對DNA進行染色,與Annexin V搭配使用,可區分處于不同凋亡時期的細胞。

      本試劑盒檢測喜樹堿誘導的Jurkat細胞凋亡效果如下圖所示:

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產品使用說明:
       本試劑盒中Annexin V Binding Buffer(10×)為10×濃縮液,實驗前用去離子水稀釋成1×工作液。
       例如:取1mL Annexin V Binding Buffer(10×),加入去離子水定容至10mL即可。


實驗操作指南步驟:
       1. 細胞按照實驗方案進行凋亡誘導,300g離心5min,棄上清,收集細胞,PBS洗滌一次,輕輕重懸細胞并計數。
       注:本品僅在懸浮培養的細胞中驗證,良好的細胞狀態是實驗的關鍵。貼壁生長的細胞用于凋亡檢測時,可能會因為胰酶消化、吹打等處理導致細胞的壞死或凋亡,對實驗結果可能存在不可控的影響,請謹慎處理。

       2. 取1-5×10^5重懸的細胞,300g離心5min,棄上清。用PBS洗滌細胞一次,離心后棄上清,加入500μL稀釋的1×Annexin V Binding Buffer工作液重懸細胞。
       3. 細胞懸液中加入5μL的Annexin V-PE和5μL的7-AAD染色液。
       4. 輕柔渦旋混勻后,室溫避光孵育15-20min。
       5. 反應完成后立即上機檢測。如不能及時檢測,請于冰上避光靜置并于1小時內完成檢測。


保存條件:
       Annexin V-PE和7-AAD染色液需要避光保存;7-AAD染色液適當分裝后-20℃可保存1年,其他試劑4℃可保存1年。


注意事項:
       1. 為獲得最佳的使用效果,請在3-6個月內使用,Annexin V-PE禁止冷凍保存;

       2. 染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加;
       3. 熒光物質均易發生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存;
      4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
(本試劑產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療)


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